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流行病学 | 华中部分地区发病猪群血清样品PCV-2 病原学检测

来源:同珂 等 中国动物检疫 2020-11-21 14:22:52| 查看:

摘要:为探究华中地区临床发病猪群猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV-2)感染状况及特点,2018—2019年,从湖北省的武汉、随州、咸宁、荆州,湖南省的常德、衡阳、汨罗、株洲等8个地市的40个规模化猪场,采集临床发病猪群血样1 550份,利用本实验室建立的巢式PCR诊断技术进行PCV-2病原学检测,并采用SPSS 24.0卡方检验,对结果进行不同地区、不同养殖阶段、不同季节统计分析,同时追踪与其他繁殖障碍性疾病病原的混合感染情况。结果显示:湖南、湖北两省8个地区发病猪群的PCV-2平均检出率为31.68%(491/1550),所有检测地区均有不同程度的PCV-2感染,病原检出率在8.79%~49.01%之间波动,差异显著(P<0.05);不同养殖阶段发病猪群均有PCV-2阳性检出,检出率在12.17%~60.84%之间波动,差异显著(P<0.05),其中育肥猪和保育猪检出率较高,而哺乳仔猪、经产母猪和后备猪偏低;PCV-2一年四季均有检出,检出率在5.98%~49.81%之间,但有一定的季节性,夏冬季节检出率偏高,而春秋季节偏低(5.98%),差异显著(P<0.05);PCV-2和其他繁殖障碍性疾病病原的多重感染较为常见,其中以PCV-2+PRRSV双重感染和PCV-2+PRRSV+PRV三重感染为主,而四重以上感染较为少见。结果表明,湖南、湖北两省的PCV-2病原分布较为广泛,是导致该区域猪群发病的重要病因,但其流行有一定的地区、猪群和季节差异。建议加强高流行地区、高发季节、重点猪群的免疫、检测和生物安全管理,逐步控制和净化PCV-2。本研究初步了解了华中地区PCV-2的流行特点,为其流行控制和净化制定提供了参考。
猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科,是迄今为止脊椎动物中最小的DNA病毒之一。PCV有多个血清型,如PCV-1、PCV-2及PCV-3等。PCV-1是猪肾细胞系的污染物,对猪无致病性,但能产生血清抗体。相比之下,PCV-2具有致病性,以侵害动物体内的免疫系统为主,是公认的世界上危害最严重的猪病病原之一,是断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)和皮炎与肾病综合征(PNDS)的主要病因。PCV-2可感染各阶段猪群:5~16周龄阶段,易导致PMWS;育肥后期(16~22周龄),则更多表现呼吸疾病综合征。最近发现的PCV 3与猪皮炎与肾病综合征以及生殖衰竭、心脏和多系统炎症有关,但其致病机制尚不清楚。
为了解华中地区临床发病猪群PCV-2感染状况及特点,2018—2019年,从湖南省、湖北省部分地区规模化猪场,采集1550份临床发病猪样本,利用本实验室建立的巢式PCR方法进行PCV2病原学检测,并分析不同地区、不同养殖阶段、不同季节及与其他疾病混合感染情况,以期为今后PCV-2净化提供依据和数据支撑。

 

材料与方法

 

样品来源
 
2018年3月—2019年2月,从湖北省的武汉、随州、咸宁、荆州,湖南省的常德、衡阳、汨罗、株洲等8个地市的40个规模化猪场(存栏量>500头),采集出现PMWS、PDNS、繁殖障碍、传染性先天性震颤(CT)、腹泻等临床症状的发病猪群,每月1次采样(前腔静脉采血),共计采集1550份血清样品,-20℃保存待检(表1)。被检猪场均按各自制定的PCV-2免疫程序进行免疫。

样品处理及病毒核酸提取
将采集的全血1500r/min 离心30min,取上清;按照Axygen体液提取试剂盒说明书,对上清进行病毒核酸提取;用Nanodrop 1000检测所提取DNA的浓度和纯度,然后将DNA于-20℃保存备用。
病原学检测
采用本实验室建立的巢式PCR检测方法,对样品进行病原学检测。引物序列如表2所示。

数据统计与分析
对不同地区、不同养殖阶段、不同季节及混合感染的检测结果,采用SPSS 24.0卡方检验进行差异性分析,P>0.05为差异不显著,P<0.05为差异显著。

 

结果与分析

 

不同地区
不同地区检测结果(图1)显示:湖南、湖北两省8个地市的PCV-2检出率在8.79%~49.01%之间波动,平均检出率为31.68%(491/1550),其中常德市最高(49.01%),其次是武汉、咸宁、衡阳、株洲、荆州、汨罗,随州市最低(8.79%)。该结果表明,这2个省区的规模化猪场均存在不同程度的感染,且不同地市间PCV-2检出率差异显著(P<0.05)。

不同养殖阶段
不同养殖阶段检测结果(图2)显示:各养殖阶段猪群均有PCV-2阳性检出,检出率在12.17%~60.84%之间,其中育肥猪(60.84%)和保育猪(58.29%)检出率较高,而哺乳仔猪(16.87%)、经产母猪(14.04%)和后备猪(12.17%)偏低。不同养殖阶段猪群的PCV2检出率差异显著(P<0.05)。

不同季节
不同季节检测结果(图3)显示:PCV-2一年四季均有流行,但具有一定的季节性,其中夏季(6—8月)检出率最高(49.81%),而春季(3—5月)最低(5.98%)。不同季节PCV-2检出率差异显著(P<0.05)。

混合感染
将送检的1550份临床样品同时进行PCV-2、PCV-3、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)病原学检测。结果(表3)显示:除PCV-3未检出外,其他4种病原均存在不同程度的单一感染,其中PRRSV单一感染率(32.39%)最高,其次是PRV(19.81%),PPV较低(13.55%),而PCV-2单一感染最低(2.45%);双重感染(49.74%,771/1550)最为常见,以PCV-2+PRRSV为主,其次是PCV-2+PRV,PCV-2+PPV最低;三重感染率(16.58%)较低,以PCV-2+PRRSV+PRV为主,其次是PCV-2+PRRSV+PPV,PCV-2+PRV+PPV最低。四重感染(0.06%,1/1550)极少。单一感染、双重感染、三重感染的检出率差异显著(P<0.05)。

 

讨论

 

随着规模猪场数量的逐渐增多,生猪交易愈加频繁,PCV-2感染率也逐年提高,给我国养猪业造成极大危害。本研究对2018—2019年华中地区湖南、湖北两省8个地市规模场送检的发病猪血清样品进行PCV-2病原学检测,发现PCV-2检出率在8.79%~49.01%之间,表明PCV-2在两省规模化猪场普遍流行,平均检出率为31.68%,表明流行较为严重。韦显凯等2016年对广西部分地区猪群5种疫病流行情况监测发现,PCV-2检出率为39.12%;蒋新华等对2013—2017年采集自江西省10个地区的1082份疑似PCV-2感染猪病料组织进行病原学检测发现,610份为PCV-2阳性,总检出率为56.4%。上述结果均表明,PCV-2在我国流行广泛且较为严重,对我国养猪业形成较大危害。不同地区间的差异,通常与猪场的饲养密度、环境控制及管理水平有关,也可能受地理环境及自然气候等因素影响。湖南省养猪业较密集,猪只调运较频繁,PCV-2通过拉猪车、污染的工具、粪便等传播的风险较高,因此应严格执行生物安全措施,实行封闭性管理,发现可疑病猪应及时隔离,并加强外进货物、车辆、返厂人员的消毒,防止病原传入。感染率低的地区应对发病猪进行有效隔离,断绝与其他健康猪只的接触,尽可能控制PCV-2的横向传播,同时严格把控引种猪只来源,坚持自繁自养。
不同养殖阶段猪群检测结果显示,PCV-2可感染各养殖阶段猪群。育肥猪(60.84%)和保育猪(58.29%)感染较为严重,而哺乳仔猪(16.87%)、经产母猪(14.04%)、后备猪(12.17%)较轻,这与刘冰许等对2015年新乡市PCV-2病原学检测的结果相近。哺乳仔猪通过摄取初乳获得母源抗体保护,从而免受PCV-2侵害。也有研究表明,仔猪在母源抗体降至临界值时,如果疫苗免疫不及时,往往在仔猪断奶后转至保育时出现PMWS症状,这也解释了保育猪群感染的主要原因。而育肥猪的饲养密度较大,猪舍环境、管理水平都有所欠缺,猪群通过口-鼻-粪或者污染工具在猪群中水平传播,因而感染概率较高。因此,仔猪应在3~6周龄接种PCV-2疫苗;育肥、保育猪养殖密度较大,可适当增设通风口、排气扇,对转栋、转栏的猪舍(环境棉拭子)、猪只(鼻/肛拭子)的PCV-2病原学抽样检测,做到环境、猪只双阴性方可转群;对母猪应采取PCV-2疫苗普免(3~4次/年)。
检测发现,该地区PCV-2感染具有一定季节性,其中夏季和冬季是感染高峰期,与段群棚等调查的结果基本一致。分析原因,华中地区夏热冬寒,湿度高,冷热应激可引起猪群不适,导致机体抵抗力下降,而PCV-2可侵害猪免疫系统,抑制体内免疫应答,影响PCV-2疫苗的效力,从而导致感染率升高。因此,夏、冬季应严格控制猪舍温度,避免因冷热应激致使猪群的免疫力降低,且PCV-2免疫程序也需参考当地气温变化进行调整。同时,也需加强夏、冬季的综合防疫工作。
本检测结果显示,PRRSV单一感染率较高,与PCV-2的双重感染和三重感染较为多见,与段群鹏的观点一致。这是因为PCV-2主要侵害猪的免疫系统,导致机体免疫力下降,从而引起多种病原协同感染。因此,规模化猪场应加强猪群的PCV-2病原学监测,完善生物安全体系,在做好PCV-2流行控制的同时,加强对其他疾病的防控和治理。

 

结论

 

综上所述,湖南、湖北两省PCV-2分布较为广泛,一年四季皆有流行,可感染所有养殖阶段猪群,与其他病原的混合感染严重,但其流行有一定的地市、猪群和季节差异,其中保育猪群感染最严重,夏、冬季节高发。建议加强高流行地区、重点猪群、高发季节的免疫、检测以及生物安全管理,逐步控制和净化PCV-2。
《华中部分地区发病猪群血清样品PCV-2 病原学检测》详情请点击“阅读原文”。
(责任编辑:朱迪国)
 

 

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