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湖北省武汉市大型规模化猪场猪圆环病毒2型流行病学调查

来源:万云等 中国动物检疫 2021-06-11 17:21:24| 查看:

 
摘要:为掌握猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)在湖北省武汉市大型规模化养猪场的流行率,并探索该病的传播风险因素,从而为科学防控该病毒提供依据,2020年4—6月采取二阶段随机抽样方法,采集猪口腔液样品进行PCV2核酸检测。第一阶段,对武汉市所有大型规模化猪场,采用估计流行率的样本量计算方式,确定抽样场数后随机抽取猪场;第二阶段,在猪场内采取发现疫病的样本量计算方式,以栏舍为单位,计算需要随机抽取的栏舍数量。同时以调查问卷方式,对场点感染PCV2有关的风险因素进行调查。结果显示:共采集22个大型规模化猪场的330份猪口腔液样本进行检测,其中8个场的55份样本检出PCV2核酸阳性,场群表观流行率为36.4%,真实流行率为38.0%(95%CI,17.5%~58.5%),阳性场点分布在5个区(全部共6个区);净道、污道不分开是场内PCV2感染的主要风险因素。结果表明,武汉市大型规模猪场的PCV2场群流行率较高,分布范围较广,各场需加强生物安全管理,以控制PCV2的流行与传播。
猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)被公认为是养猪业的重要病原,是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,也可引起猪皮炎肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道疾病复合征(PRDC)、A2型先天性震颤(CT)及母猪繁殖障碍等疫病。PCV2对外界抵抗力非常强,可同时与猪细小病毒、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等病原发生混合感染,导致整体致病性增强,使猪只死亡率明显升高,从而给养猪业造成巨大经济损失。当前,我国多地均有PCV2感染的报道。为掌握武汉市大型规模化养猪场的PCV2流行率,并探索其传播风险因素,2020年4—6月对武汉市22个大型规模化养猪场抽样采集猪口腔液样品,采用PCR方法进行PCV2核酸检测,以期为科学防控该病提供依据。
 
 

方法

 
 
目标群体
以武汉市的蔡甸、江夏、黄陂、新洲、东西湖、经济开发区等6个区作为调查区域,将这些区域内所有年出栏大于1万头的规模化养猪场作为目标群体。
样品采集及检测
以单个栏舍为单位,将灭菌粗棉绳系在栏舍栏杆上,并保持与猪身同高。猪只充分咀嚼粗棉绳0.5 h后,将棉绳取下,刮取和挤压绳上的口腔液,收集于灭菌离心管中保存,用于PCR检测。检测试剂盒,使用世纪元亨公司生产的猪圆环病毒PCR检测试剂盒。
抽样策略
本研究采取二阶段随机抽样方法。第一阶段,对武汉市所有大型规模化猪场,采用估计流行率的样本量计算方式,确定抽样场数后随机抽取猪场。全市共有28个大型规模化养殖场。参考前期监测数据,置信水平设为95%,可接受绝对误差设为10%,场预期流行率设为30%,计算得出抽样场点数应为21个,实际随机抽取22个。第二阶段,在猪场内采取发现疫病的样本量计算方式,以栏舍为单位,计算需要随机抽取的栏舍数量。因年出栏大于1万头的猪场,其存栏量应≥6 500头,假设每个栏位圈养20头,则整个猪场栏位应≥300个。采用发现疫病的方式计算,置信水平设为95%,试验敏感性设为95%,栏舍预定流行率为20%,当群体大于100头时,样本量均为14份,实际从每个场点随机采集15个栏舍的口腔液样本,重点选取圈养多头猪只的栏舍。
病例定义
阳性栏:采集到的口腔液样品,经PCR检测为PCV2核酸阳性的栏;低流行率场:阳性栏检出率<20%的场点;高流行率场:阳性栏检出率≥20%的场点。
问卷调查
问卷内容包括,养殖场基本养殖情况、引种情况、免疫情况、消毒措施、发病情况等。采取现场填写、电话问询等方式进行。
数据分析
使用Excel、WinEpi、SPSS等软件对数据进行整理,计算大型规模化养猪场PCV2的场群流行率;使用地图慧在线地图工具(http://e.dituhui.com/app)绘制场点空间分布图,并寻找该病传播的风险因素,进而分析原因并提出相应防控措施。
 
 

结果与分析

 
 
总体情况
在6个区的22个大型规模化养猪场的330份猪口腔液样本中,检测出55份PCV2核酸阳性(表1)。阳性样品分别来自8个规模猪场(表2)。所调查的6个区中有5个区均检测到PCV2阳性场点,场点空间分布见图1。

 

场群流行率
从22个猪场中检测出8个场为PCV2核酸阳性,场群表观流行率为36.4%(8/22)。设PCR的试验敏感性Se为95.0%,特异性Sp为100%,计算得出群敏感性HSe为95.8%,群特异性HSp=100%。通过真实流行率公式计算,得出武汉市大型规模化猪场PCV2病原群体真实流行率为38.0%(95%CI,17.5%~58.5%)。
风险因素
根据调查问卷,选择出8个因素(均为二分类变量)进行单因素分析,利用2×2表格,将数据进行Fisher确切概率法计算,结果仅1个因素即“净道、污道是否分开”具有统计学意义(P≤0.05),具体见表3。

 
 

讨论

 
 
口腔液采样方式
口腔液样品采集以栏舍为单位,在收集过程中可能混有环境样品,因此该种采样方式无法用于掌握动物个体流行率,而是更有利于更加全面掌握猪群及猪场的整体病原存在状况。为此本研究采取发现疫病的抽样策略进行抽样。此外,根据前期本实验室研究结果及PCV2侵入动物机体的特性,从口腔液中能够检测到的PCV2病原含量与从组织样品中的会存在一定差异,从口腔液中检测到病原的时间(疫病早期)可能更早,但能够从组织中检测到的PCV2数量可能更多。因此,该采样方式对判断场点的带毒情况还需做更深入研究。
加强生物安全管理
受全市大型规模化猪场数量的限制,本研究对象数量较少,对风险因素进行统计分析,仅找出1个与PCV2相关的风险因素“净道、污道是否分开”,而其他生物安全风险因素关联性较弱。但是“净道、污道是否分开”能够反映养殖场对生物安全防护的重视水平,说明加强生物安全管理是防控圆环病毒病的关键点之一,如场点远离交通要道、场内结构分区合理、污道净道分离、运输车辆使用专业洗消烘设备、自繁自养等措施,均能在一定程度上控制PCV2传播。
局限性
受新冠肺炎疫情影响,该横断面研究采样持续时间较长。且本市大型规模化养猪场总数为28个,数量较少,可能采取普查的方式进行采样监测结果会更加准确,但因采样时部分场点封村封路,未能对所有场点进行抽样。同时,因场点数较少,导致后续风险因素分析的置信度较低,找到的风险因素较少。
本研究在场内采用发现疫病的策略进行随机采样。根据前期本实验室检测结果与经验判断,将PCV2栏舍流行率预设为20%。因该预设数值较高,导致采样数较少。在后续统计分析中,未检测到阳性样品的场,并不代表一定是阴性场,只能说明该场PCV2栏舍流行率低于20%,仍有可能是阳性场。因此,本研究以场内PCV2阳性栏舍检出率20%为界,划分PCV2高流行率场和低流行率场,并进行风险因素分析,但全市大型规模化猪场PCV2实际的真实场群流行率可能更高。
受总体检测样品数量的限制,在研究设计阶段,未对场内猪群进行更加细致的规划采样。如根据PCV2的流行特点,在场内采取分层抽样方法,将猪群分为仔猪群、后备母猪群、经产母猪群、公猪群等,分别分析PCV2对不同种群的影响;针对PCV2不同毒株疫苗的使用,探讨疫苗对PCV2的影响。同时,在调查问卷中也需要增加更多疾病传播风险相关问题。
 
 

结论

 
 
调查发现:武汉市大型规模猪场的PCV2场群流行率较高,流行范围较广;净道、污道不分开是场内PCV2感染的主要风险因素。因此,各场需通过强化生物安全管理来控制PCV2的流行。
《湖北省武汉市大型规模化猪场猪圆环病毒2型流行病学调查》详情请点击“阅读原文”。

(责任编辑:朱迪国)

 

《湖北省武汉市大型规模化猪场猪圆环病毒2型流行病学调查》作者万云等7人已将本文在《中国动物检疫》2021年第4期发表。本文为原创信息,转载请标明出处:中国动物检疫。

 

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